第四屆華東地區色譜、質譜學術報告會暨儀器展示會上，二十余位學術專家和儀器公司的技術專家做了精彩的學術報告，內容包括近兩年來色譜、質譜技術研究、分析測試方法等在食品安全、環境、化工、生物醫藥（包括體內藥物分析）、農藥、農殘、藥殘等領域的分離、分析和質量控制等方面的發展和應用等；并展示了一批國內外最新色譜、質譜分析儀器及相關產品在以上各領域的應用。以下是學術報告簡要介紹。

　　中科院大連化學物理研究所的張玉奎院士做了題為.蛋白質分離和鑒定的新技術新方法..從定性到定量.的報告。首先，張院士回顧了近年來，國內科學工作者們在蛋白質組分離鑒定中在定性分析領域取得的進展，包括：高豐度蛋白質去除、低豐度蛋白質富集、建立蛋白質分離鑒定平臺、液質聯用高靈敏度鑒定等方面；尤其是在2010年取得了很多新進展。比如：發展了一種通用型肽段富集材料，制備了表面固定銅離子的介孔磁性硅膠微球，可顯著提高肽段的鑒定靈敏度。發展了兩種方法，包括：提高分離鑒定通量的激光輔助酶解技術，磷酸化肽數據處理方法。建立了三個平臺，比如：在發展高效快速蛋白質分離鑒定平臺方面，建立了蛋白質多維分離－溶劑置換－在線酶解－多肽分離－質譜鑒定的高通量平臺用于鼠腦蛋白質組鑒定，21 小時內鑒定出2014種蛋白質，分析通量與國際領先水平相當。還發展了高通量陣列蛋白質分離鑒定平臺；建立了規模化磷酸化蛋白質組分離鑒定平臺等。接下來，張院士介紹了中國和全球科學家們在蛋白質組學研究中面臨的新挑戰。從全球蛋白質組學發展的前一階段里看，中國承擔了整個人類蛋白質組學計劃中的人類肝臟蛋白質組學全譜分析任務，目前可達到每年鑒定12000 個唯一蛋白（unique protein）的水平，處于國際領先地位。蛋白質組學發展至今，在約20344個蛋白質組成的人類蛋白質庫中，已經發現了約7000個強證據、約 5000個弱證據，還有8000多個沒有證據需要新的技術，而這些很多是低豐度（低拷貝）的蛋白，今后5~10年的挑戰將是從高拷貝到低拷貝數、從定性到定量分析。
  　　在定量新技術/方法中，已經出現的包括：非標記絕對定量，如歸一化定量、SRM/MRM定量；穩定同位素標記相對定量，如iCAT、iTRAQ、AACT/SILAC定量；化學衍生標記，如乙酰化/ICPL化學修飾定量、DIGE熒光標記定量等，近10年來這些定量方法均發表了大量文獻，比如：酵母蛋白質組的SILAC質譜定量；化學衍生標記質譜相對定量；還有中國科學家們發表的如：O18串聯酶促標記糖位點定量新方法；應用于血漿蛋白質組的基于多維色譜分離的蛋白質定量新方法；肝臟蛋白熒光標記蛋白質定量新方法；以稀土元素為質量標簽的定量蛋白質組新方法等。當前最值得關注的定量方法是SRM/MRM定量技術以及SRM/MRM和其它方法結合的定量技術，最近文獻對比（Natrue Biotech 2010, 78, 710-721）表明，LC-MS MRM分析策略選擇性、動態范圍、重復性好，定量具有明顯優勢。比如Nature（Nature 2009,460, 762-766.）曾介紹了一種組合定量方法，綜合運用等電聚焦 液相色譜兩維高效分離、MRM和質譜計數雙重定量，應用于勾端螺旋體，實現了相當于83%總蛋白數的蛋白定量。因此，在2010年9月悉尼的蛋白質組組織年會（ HUPO）上，科學家們正式宣布啟動人類蛋白質組計劃，其中以定量技術為基礎。國外目前已經發展了以Matties Mann、Matties Ulan、Redi Aebersold、John Bergeron等主流科學家參與的染色體蛋白質組計劃，采用質譜為主要手段的 MRM定量技術，來建立人類基因.蛋白質.特異肽的特異肽段組數據庫。中國科學家們也亟待探索和建立更多的蛋白質組學定量新技術新方法，包括利用新型分離介質、多維分離技術的高效分離手段；通過樣品富集、提高儀器靈敏度來實現的高靈敏度檢測；以及建立高精度定量的新方法等。
  　　來自中國藥科大學的盛龍生教授做了題為.代謝物鑒定的質譜儀器與技術.的報告。盛教授首先介紹了常用的LC-MS儀器及其原理，在代謝物鑒定中， 常用的與LC 聯用的質譜儀器有：四極質譜儀（QMS）、三重四極質譜儀（TQMS）、四極-線性離子阱質譜儀（QTrap）、四極-飛行時間質譜儀（Q- TOFMS）、離子阱-飛行時間質譜儀（IT-TOFMS）、線性離子阱-靜電場軌道離子阱（LIT-Orbitrap）等。目前， 最常用的仍然是用 TQMS ， QTrap ，但是，高分辨質譜（HRMS）的使用日益增多 ， 尤其是 Q-TOFMS 。 由于HRMS 的固有優點和硬件、 軟件的發展， HRMS 很可能將成為鑒定代謝物的主要技術平臺。接下來盛教授介紹了代謝物鑒定的方法。用LC/MS 鑒定代謝物通常分兩個步驟：（1）在樣品中發現代謝物；2）采集產物離子譜鑒定代謝物。代謝物可分為可預期的和不可預期的兩類：（1）可預期的代謝物（普通代謝物）通過已知的生物轉移反應生成， 這些代謝物的分子量可由母體藥物預測。（2）不可預期的代謝物（非普通代謝物）系通過非常規的或一系列的生物轉移反應所生成， 這些代謝物的分子量難予由母體藥物預測。而在生物樣品中鑒定代謝物具一定的挑戰性，生物樣品基質復雜，低濃度的代謝物常被內源性代謝物抑制或掩蓋。隨后盛教授介紹了各種LC-MS在鑒定代謝物中的具體方法和技術。其中重點介紹了：基于四極儀器（如TQMS和Qtrap）的方法技術，包括產物離子掃描、母離子掃描（PI）、中性丟失掃描（NL）等，以及新型基于Qtrap的多離子監測MIM技術；在分析方法中，主要介紹了多變量分析方法（PCA）。近年來，基于高分辨儀器（如QTOFMS）用于代謝物研究的應用日益廣泛，可以應用產物離子譜研究，在方法中，可以用MDF， PIF， NLF， BGS， MFE， PCA等數據處理技術來發現不可預期的代謝物。盛教授專門介紹了新型方法如：質量差值過濾（MDF）方法；應用線性離子阱-Orbitrap及數據處理技術來檢測代謝物的方法；高 -低碰撞能量切換Q-TOFMS分析代謝物的方法；分子信息提取（Molecular Feature Extract）方法等。最后介紹了統計分析和化學計量學數據分析方法。
  　　來自北京大學化學與分子工程學院的劉虎威教授做了題為.脂質組學研究的正反相二維液相色譜-四極桿飛行時間質譜聯用方法及其應用.的報告。他首先介紹了磷脂研究的重要性，和磷脂代謝異常密切相關的疾病主要有動脈粥樣硬化， 糖尿病， 肥胖癥和帕金森綜合癥等疾病。比如北京大學醫學院研究了一種腹膜透析的方法，對腎臟病患者是有效的治療方式。但到目前為止，還沒有對腹膜表層和透析液磷脂的分子成分做過系統的研究，因此，開發快速，準確的磷脂定性和定量方法，對腹膜表層和的腹透液磷脂進行研究，可以監測腹膜功能的變化，探尋導致腹膜結構和功能變化的機制，并可對臨床治療提供指導。國外已開展了脂質組學的相關研究，包括采用shotgun的組學研究方法、LC-MS為基礎的方法等。劉教授課題組針對該課題，開發了一種接口技術進行正相色譜到反相色譜再到質譜（2D LC（NPLC/RPLC） -Q-TOF-MS ）的在線聯用，獲得了高效分離、高通量分析、高靈敏度檢測、在線自動聯用的效果。結果表明，利用該系統成功鑒定了427個標志物。

　　來自浙江大學化學系的朱巖教授做了題為.高效液相-離子色譜柱切換方法分析反恐爆炸物殘留組分.的報告。朱教授首先介紹了國際上從事反恐研究的意義，隨著國際恐怖事件的不斷升級和國內外形勢的復雜化，各國軍/警方都投入大量人力物理，建立了相應分析方法尤其是爆炸物殘留的分析方法。但是爆炸物成分復雜，通常包含大量的有機物及無機物，因此需要建立一種快速、有效的方法來同時檢測爆炸物殘留中的有機成分及無機離子。根據美國環保局SW-846方法8330，有待分析的14種有機爆炸物主要包括硝基雜環烷、硝基苯類，無機爆炸物主要有硝基銨類、氯酸鉀類爆炸物和黑火藥，這些無機物離子均可以用離子色譜法分離檢測。目前的反恐分析方法一般將有機成分及無機成分簡單地用HPLC和離子色譜分別檢測，耗時耗樣，在樣品含量特別少時比較困難。朱教授課題組建立了一種同時檢測爆炸物中有機成分和無機離子的方法，應用高效液相色譜和離子色譜柱切換方法，40分鐘內同時檢測了14種有機爆炸物成分及5種無機陽離子，并獲得良好的檢出限、重現性和回收率。該方法主要由四步驟組成：（1）自動進樣器將樣品注入分析系統，在液相色譜流動相下，樣品進入Acclaim Explosive E1柱，無機組分無保留，在死時間內即被沖出，有機組分得到分離；（2）無機組分沖出后，切換六通閥，由富集柱收集沖洗出的無機組分；（3）收集完全后再次切換六通閥，由離子色譜流動相沖洗富集柱，將收集到的無機離子帶入離子色譜分析柱分析。

　　復旦大學的張祥民教授做了題為.功能化納米材料研究與蛋白質選擇性富集分離技術.的報告。張教授在報告中簡要回顧了蛋白質組學研究的意義及復雜性，指出生物體內蛋白質種類繁多、性質復雜、數量龐大，而其中以磷酸化和糖基化修飾為代表的翻譯后修飾研究，對現行的蛋白質組學研究方法和技術提出許多挑戰。相對于普通材料，功能化納米材料具有極大的比表面積和極高的表面活性。課題組針對翻譯后修飾測定中蛋白質高效選擇性富集方面的熱點難點問題，將功能化材料與蛋白質分析結合起來，開展了一系列研究工作，發展了一些基于功能化材料的磷酸化和糖基化蛋白質組學研究新技術新方法。

　　與IMAC相比，磁性納米新材料具有更高的選擇性，并且對低 pH溶液、鹽類、其它低分子污染物有更高的耐受性。課題組先后研究合成了TiO2、ZrO2、Ga2O3等金屬氧化物包覆的磁球，并成功用于磷酸化肽段的富集。同時還合成了Fe3O4@C@Ta2O5和Fe3O4@C@SnO2磁球用于磷酸化肽段富集，展現了優越的富集選擇性。課題組還研究了糖肽和糖蛋白的富集鑒定新方法。首先合成了納米級金粒子，然后通過高溫煅燒將這些納米金顆粒燒結到MALDI-QIT-TOF-MS靶板上，再利用金和巰基之間的相互作用在這些納米金顆粒表面修飾上巰基苯硼酸，用來選擇性富集糖基化的肽或者蛋白質。進而發展了用.三明治.固定方法在硼酸納米磁性微球表面固定了凝集素蛋白（Con A），并將其用于糖基化蛋白的分離富集。球表面直接固定Con A相比，利用上述.三明治.方法固定的Con A量提高了三倍。Con A納米磁球、硼酸磁球和商品化的Con A磁球用來進行人肝癌細胞株7703細胞裂解液中糖蛋白的分離富集，獲得了比商品化的Con A磁球更好的結果，具有制樣簡單、成本低、固定效率高、使用方面、親和效率高等特點。課題組還發展了其它一些富集方法如：C60作為親和配體的磁性低豐度富集方法，核-殼-殼結構磁性納米材料高靈敏度檢測蛋白質和肽方法，表面固定銅離子的介孔磁性硅膠微球及其選擇性富集肽與高靈敏度質譜鑒定方法等。
  　　來自南京大學化學化工學院生命分析化學教育部重點實驗室的劉震教授做了題為.新穎硼親和方法及其在組學分析中的應用.的報告，劉教授介紹了其課題組對硼親和新材料和方法的設計思路，以及硼親和材料在蛋白質組學和代謝組學分析中的應用。順式二羥基生物分子，包括糖蛋白、糖肽、核苷、核苷酸、兒茶酚胺、糖類和DNA等，是一類特別的化合物，是目前蛋白質組學、代謝組學、糖組學和RNA研究等領域中的重要研究對象。對這些生物分子的選擇性富集和高效分離具有重要意義。取代硼酸是一類獨特的配基，能與順式二羥基化合物在堿性條件下結合形成穩定的絡合物，當介質的pH切換為酸性時，絡合物解吸釋放出順式二羥基化合物。取代硼酸具有三個顯著的優點：1）共價結合，親和力強；2）可逆反應，結合/解吸過程容易控制；3）在酸性條件下解吸，解吸條件的質譜兼容性好。這些優點使得取代硼酸成為非常理想的親和配基，特別適合于以質譜為核心的組學分析方法。劉教授課題組系統地研究了針對順式二羥基生物分子的選擇性富集和高效分離的新穎方法，發展出了一系列不同結構和性能的硼親和整體毛細管柱、一系列不同結構和性能的硼親和磁性納米粒子、多種硼親和固相微萃取探針和毛細管、以及相應的富集和分離方法。為了克服常規取代硼酸在中性pH下的親和能力較弱的缺點，課題組原創性地提出了.團隊硼親和.的原理和兩種相應的方法：開環聚合法和分子自組裝方法。和常規的硼親和性比較，團隊硼親和具有三大優點：一、一步反應，制備步驟非常簡單；二、中性pH條件下親和力大大增強；三、選擇性更專一。團隊硼親和具有四個潛在的應用領域：1）蛋白質組學；2）代謝組學；3）糖組學；4）RNA研究。

　　中科院大連化學物理研究所的許國旺研究員做了題為.我們應用如何健康地生活：代謝組學研究的啟示.的報告。許研究員介紹了代謝組學研究在糖尿病學研究中的意義。隨著中國經濟的快速發展和生活方式的改變，我國的疾病譜也在發生快速改變。據報道，從1985年到2000年，我國7－18歲兒童肥胖人口增加了28倍。而根據 2007－2008年對來自14個省市的46239個20歲以上成年人的研究表明，糖尿病和糖尿病前期的發生率分別為9.7%和15.5%，分別達到 9240萬和1.428億。糖尿病的流行給國家和人民帶來了沉重的經濟負擔。代謝組學作為功能基因組學和系統生物學研究中不可或缺的重要組成部分，近年來在疾病、藥物、植物基因功能和表型的研究等方面顯示出了極大的潛力。許研究員介紹了課題組在自己實驗室應用代謝組學方法開展糖尿病、糖尿病前期人群代謝特征的研究，及OGTT和運動過程中糖脂代謝等的變換，為健康的生活方式..少吃多動..提供了研究證據。比如從代謝組學的角度研究獲得的結果得到了幾個有趣的啟示。在飲食上，要控制飲食攝入；攝入不飽和脂肪酸比飽和脂肪酸更為健康。在運動方面，揭示出運動可以消耗儲存的糖原和脂肪，并研究了肉堿（尤其是中鏈肉堿）的作用，證明其可提高脂肪酸.;-氧化能力。另外，還比較了長期堅持運動與偶爾運動之間的模型，揭示出單次運動雖可以消耗體內儲存能量，但運動后肝內會補償性儲存更多的脂肪；只有長期堅持運動才能改善代謝，消除體內多余物質。還比較了過度運動與適度運動之間的模型，揭示出適度運動有益而過度運動會導致尿酸的積累，有損肝臟健康。
  　　來自南京大學化學化工學院、生命分析化學教育部重點實驗室的練鴻振教授做了題為.正辛醇-水分配系數HPLC測定中的幾個問題.的報告。練教授首先回顧了正辛醇分配系數Kow的定義，在平衡狀態下，化合物在正辛醇相中的濃度與在水相中（非離解形式）的濃度的比值。Kow測定的意義不言而喻，比如可研究藥物在體內的分布和轉移，環境中研究物質在水相和有機相中的分布等。如何獲取Kow數據呢？國際上經典的方法是搖瓶法，但該方法非常繁瑣費時，也不適合疏水性大的物質。另一種計算法（比如用商業的ACD/Labs軟件）不適合結構復雜的化合物，也不很準確，風險大。而傳統的HPLC法雖然方法簡單，但也面臨準確性的挑戰和適用范圍。目前國際上存在計算Kow的問題為：實驗數據稀缺；軟件各種計算方法相差大風險大；權威國際組織或數據庫推薦的數據數量很小；報道也是各取所需，報道混亂。舉例來說，過去搖瓶法測定萘、聯苯、DDD、DDE等物質的Kow 數據，用HPLC方法要么就干脆沒有，要么報道相差很大。而軟件計算方法總是有風險，通行的幾種軟件（如Broto＇s Fragemtn、ACD/Labs）之間計算結果差別也較大。

　　練教授課題組發展了一種Kow的RP-HPLC（反相高效液相色譜）測定方法，具有簡單快速、重現性好、所需樣品量少、無需定量的優點。在這種方法中，要求將保留時間測得很準，而且需要一套模型化合物（與被測物化學結構相似，已知準確的Kow），然后建立擬合方程。對于中性化合物來說，課題組發展了.保留時間兩點校正法.，即采用標準柱（柱子第一次使用時）的保留時間數據來做兩點（錨點）校正，從而提高保留時間測定的準確性，從而提高Kow測定準確性。課題組已用該方法做了DDTs、PCBs（多氯聯苯）的Kow測定，并通過實驗法與計算值的比較，說明計算法風險隨化合物疏水性增加而增加，搖瓶法只能測準到Kow在5.0以下的化合物，練教授課題組已可用建立的方法測定了 Kow在7.5以下的化合物（包括疏水性強的）。對于弱離解化合物來說，環境或生命物質常常會有離解，因此測定弱離解化合物Kow意義更普遍，但難度更高。過去大家常在流動相中加入離子抑制劑，保證有合適的保留；練教授課題組將logKow -logKw線性關系推廣至以酸或堿做離子抑制劑的IS-RPLC中；考慮了弱離解化合物在流動相中的離解，并將Kow修正為Kow"（表觀正辛醇分配系數），考慮了離解部分對Kow削弱的貢獻，更準確地綜合體現了弱離解化合物的結構特性；而且大量實驗證明，logKow" － logKw比logKow－ logKw具有更好的線性相關性（注：Kw為外推至假想的純水流動相中的保留值），并且該線性關系不受特定實驗條件（如儀器、色譜柱、柱溫、有機調節劑、離子抑制劑等）的影響。利用該方法舉例了馬兜鈴酸的Kow測定，將中性和酸性化合物合并成一組模型化合物，解決了弱離解化合物標準Kow值來源困難的問題。

　　來自江南大學食品科學與技術國家重點實驗室的戴軍教授做了題為"HPLC在功能性糖類分析中的應用與進展"的報告。戴教授介紹了功能性低聚糖及多糖研究的重要性；功能性低聚糖的分析鑒定；活性多糖的定性定量檢測。多糖是當前生命科學、醫藥和功能食品等領域的重要的研究熱點之一；HPLC作為現代分離分析技術，在多糖的研究開發和多糖類產品的質量控制中發揮著不可或缺的作用。戴教授課題組在功能性低聚糖分析鑒定中，發展了綜合的HPLC方法，并進行了低聚糖的摻偽檢測和LC-MS的聯用分析。在活性多糖的定性定量檢測方面，課題組發展了分子量分布及單糖組成分析方法、多糖的含量測定方法，并研究了指紋圖譜分析及其在質量標準中的應用等。

　　來自南京市環境監測中心站的楊麗莉研究員做了題為.色譜技術在環境污染監測中的應用.的報告。楊研究員簡介紹了環境和環境污染，環境污染監測的分析體系，色譜技術在環境污染監測中的應用三方面的內容。環境污染監測的特點是，環境容量大、污染物濃度低。境污染監測的分析體系包括：化學分析、光譜分析、色譜分析、生物分析法等。而色譜技術在環境監測中的應用廣泛，在EPA優先控制的污染物、我國環保部優先控制的水中污染物、POPs持久性有機污染物、內分泌干擾物EDCS等影響人類健康的絕大多數污染物都是有機化合物，分子量在 500以下，非常適合色譜分析。隨后，楊研究員介紹了常見的色譜分析手段、針對的樣品分類，并介紹了各種環境樣品色譜分析前的前處理技術，聯用技術，以及在線監測技術。

　　來自中國科學院上海有機所、上海質譜中心的郭寅龍研究員做了題為.小分子化合物的質譜學研究.的報告。報告主要介紹了生物小分子的質譜分析方法研究，和生物小分子的氣相化學研究，以及大量的實際案例分析。在有機小分子化合物質譜分析方法研究中，介紹了：頂空結合質譜技術分析生物小分子化合物、解吸電噴霧質譜（DESI-MS）技術分析生物小分子化合物、激光解吸質譜技術分析生物小分子化合物幾種方法。比較新穎的研究如：頂空-固相微萃取-氣相色譜-質譜聯用分析香精香料；頂空結合GC-MS/MS或高分辨GCMS（GC-TOF）質譜進行高精度小分子確證；頂空-單液滴萃取（HS-LPME）以及相應的衍生化技術直接分析煙草中的揮發性堿性成分；LPME/MALDI-FTMS用于單口煙氣中煙堿的定量分析、和單口煙氣中小分子醛的定量分析。解吸質電噴霧譜（DESI-MS）技術分析生物小分子化合物如大蒜切片中的蒜素；衍生化解吸電噴霧電離質譜法研究蒜素和半胱氨酸作用。碳納米管及其衍生物作為MALDI分析中基質，可以高效率分析小分子化合物，如氨基酸和中性小分子糖。基于小分子MALDI-FTMS的分析技術，可用于急性腎移植排斥反應代謝組學研究、和膽堿酯酶活性研究和拮抗劑拆選。牛奶中.;-內酰胺酶類解抗劑的高通量MALDI-FTMS檢測方法研究等。在生物小分子的氣相化學研究中，介紹了有機小分子化合物的氣相化學研究基礎，和氣相反應技術用于分析小分子化合物的應用。

　　江蘇省疾病預防控制中心的劉華良研究員做了題為.液相色譜、質譜在化妝品衛生檢測中的應用.的報告。在報告中，劉研究員系統地介紹了化妝品的定義、分類、化學成分和相應的法律法規。如想很好地分析檢測這類物質必須了解化妝品生產的工藝。而構成的化妝品基本原料主要包括：油溶性基質、水溶性基質、固體粉末基質、表面活性劑、膠質類原料、香精和香料、著色劑、防腐劑、抗氧化劑、功能性原料和添加劑等。在我國根據2005年統計有近5000家化妝品生產企業，其中以廣東省居多（占比近一半）。中國關于化妝品衛生規范是2007年由衛生部頒布的，其中第三部分衛生化學檢驗方法有28項，涉及色譜檢驗項目12項，包括 IC，GC，LC。下面舉例了用色譜法測定化妝品中甲醛、甲醛釋放劑、防腐劑苯氧乙醇、2-4碘代丙炔基氨基甲酸丁酯等。在用質譜檢測化妝品的應用方面，性激素、激素、抗生素、丙烯酰胺、.;-內酰胺等都涉及質譜方法。劉研究員也舉例了以上代表性物質的分析方法。最后劉老師介紹了幾點自己的體會和思考，比如做化妝品檢測要先學習化妝品的制作工藝，化妝品的檢驗應該與生產企業合作，從方法上來看，禁用的物質用質譜，定性好，可以多組分分析、高靈敏度、快速。限用的物質用色譜，準確度更高。

　　來自江蘇省食品藥品檢驗所的袁耀佐博士做了題為.液相色譜質譜聯用技術在氨基糖苷類抗生素雜質譜研究中的應用.的報告。在報告中，袁博士首先簡介了氨基糖苷類抗生素；然后介紹了雜質譜的概念、意義及有關規定。雜質譜 （impurity profile）是對存在于原料或制劑中已鑒定或未鑒定雜質情況的描述，通常在藥物報批和藥品檢驗中都要測定雜質譜。袁博士接下來介紹了氨基糖苷類抗生素雜質譜研究面臨的挑戰及對策。典型的一個問題是色譜分離與質譜檢測之間的矛盾，如氨基糖類抗生素在常規反相色譜柱中不保留，通常色譜中采用多氟酸作為離子對增加保留，但多氟酸對質譜的離子化具有嚴重的抑制效應，文獻中雖有一些對策，但很多效果有限、影響靈敏度，也僅針對某些物質。袁博士實驗室目前應用寬 pH范圍的反相色譜柱，用高ｐＨ的流動相，增加氨基糖苷類抗生素的色譜保留，其優點為：分離度好，靈敏度高，儀器維護容易，進樣濃度可以增大，成功地解決色譜分離和質譜檢測之間的矛盾。目前已成功應用于依替米星、奈替米星、西索米星、小諾霉素，慶大霉素C1a等藥物，但還不能分離阿米卡星和阿貝卡星。典型的第二個問題是如何鑒定或推定檢出雜質的結構？實驗室建立了LC-MSn鑒定有關物質結構的基本思路，進行對照品對照、特征離子診斷等方法，但鑒定還有局限性，質譜還不能完全解決結構鑒定的問題，尤其是全新的化合物。最后袁博士在展望中提到幾點：1）新色譜柱填料的出現，將使分離容易、流動相簡單。2）在線脫鹽技術的普及，會使雜質譜研究常規化。3）高分辨質譜的普及，解譜軟件的普及，使得結構分析變得簡單。4）新的聯用技術如LC-NMR的成熟，會使得結構分析的準確性大大提高。

　　來自江蘇出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心食品實驗室、國家農獸藥和蜂產品檢測重點實驗室的丁濤博士，做了題為.蜂蜜摻假檢測技術研究.的報告。報告指出，蜂蜜摻雜是一個日趨嚴重的問題。其主要原因是蜂蜜資源的有限性與急劇增加的市場需求之間的矛盾，導致蜂蜜價格一直居高不下。一些不法廠商在天然蜂蜜中摻入一些物質，制造摻雜蜂蜜，以獲取高額利潤。國標雖有GB18796-2005方法，但即使按照該標準檢驗，仍有大量造假現象；這時需要采用穩定碳同位素測定方法。1971 年， Smith 和Epstein 首先報道了植物的不同光合作用途徑（特別是酶反應） 在碳穩定同位素上具有生物歧視效應，對12C 和13C 的比值產生了微小的但可檢測的變異。利用這項技術，White 博士分析了500 多個來自不同國家和地區的純正天然蜂蜜樣品，也分析了大量人工制備的摻有不同比例高果糖玉米糖漿（C4植物糖）的蜂蜜樣品。通過這些蜂蜜樣品結果的分析統計，得出的結論是：δ13C 值負于 -23.15 ‰的蜂蜜是沒有摻假的純正蜂蜜；δ13C 值大于 -21.15 ‰的蜂蜜，假蜜的概率為99.996 %。蜂蜜中另一種重要成分是蛋白質，研究結果表明，用蜂蜜蛋白質做內標物對.灰色區.蜂蜜中摻入高果糖玉米糖漿的鑒定是行之有效的。結果分析也很簡單，只要計算出蜂蜜蛋白質δ13C 值減去蜂蜜δ13C 值的差值即可，這個差值叫做ISCIRA 指數，當該指數為 -1 ‰時，蜂蜜中存在7 %的C4 糖。這個指數越負，說明蜂蜜中摻入的C4 糖越多，也就是摻入的高果糖玉米糖漿越多。

　　這時有造假者使用更為先進的摻假手段：摻入C3 植物糖！這時前端接元素分析的EA-IRMS法無能無力，因為蜂蜜中的糖與C3植物糖的同位素值很接近，摻入后不會導致蜂蜜同位素值發生很大變化。最新技術發展了LC-IRMS法，將液相色譜分離技術與穩定同位素質譜技術結合起來，對蜂蜜里的各種糖利用液相色譜進行分離，再通過穩定同位素質譜測定各種糖的碳同位素比值，方法的優點是：更加靈敏，可以鑒定較低含量的摻假，可以鑒定C3植物糖的存在。新一代的造假方法是使用外源性酶，技術較高的摻假者在糖漿中加入外源性的酶，通過酶解反應將糖漿轉化為果糖糖漿、葡萄糖漿、果葡糖漿，添加合稱色素、蜂蜜香精、工業淀粉酶，從而獲得全假蜂蜜。但純正蜂蜜中本身沒有這種外源性的酶，假蜂蜜存在外源性酶的殘留。因此可使用.;-呋喃果糖苷酶的檢測方法：.;-呋喃果糖苷酶可將棉子糖轉化為蜜二糖和果糖，蜂蜜中的酶不與棉子糖發生反應。在蜂蜜中加入一定量的酶的底物（棉子糖），在一定溫度下反應一段時間，通過色譜即可鑒定。